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神經(jīng)衰退疾病研究新工具---α-突觸核蛋白寡聚體(SPR-484)

更新時(shí)間:2022-09-15   點(diǎn)擊次數(shù):1096次

StressMarq商業(yè)投產(chǎn)α-突觸核蛋白寡聚體具有如下優(yōu)點(diǎn):

①高含量α-突觸核蛋白寡聚體

②動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定 (kinetically stable/trapped)

③不含任何誘導(dǎo)劑或抑制劑 (多巴胺,EGCG)

④可用于活性電泳 (Native PAGE),體內(nèi)體外檢測(cè)及疾病建模

⑤stressmarq能夠量產(chǎn)α-突觸核蛋白寡聚體


神經(jīng)衰退疾病研究新工具---α-突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 

上圖為動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定(kinetically stable) 的α-突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 電鏡圖。該寡聚體沒(méi)有使用任何誘導(dǎo)劑或抑制劑來(lái)鎖定寡聚體狀態(tài),并且寡聚體含量能達(dá)到90%。

 

Stressmarq的SPR-484 的負(fù)染色透射電子顯微鏡圖像在 80 Kv 下使用磷鎢酸和醋酸鈾染色在碳涂層的 400 目銅網(wǎng)格上獲得??梢郧逦目吹焦丫垠w結(jié)構(gòu),并且具有很高的均勻性。 

神經(jīng)衰退疾病研究新工具---α-突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 

動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 可在凍融后37℃下孵育兩周仍然穩(wěn)定 

(A)凍融一次后的動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定寡聚體的Native PAGE 

(B)和(C)分別是凍融一次后的和37℃孵育兩周后的尺寸排阻色譜(SEC)

 

在峰值處,90%SPR-484在凍融后37℃下孵育兩周仍然穩(wěn)定于寡聚體狀態(tài)

神經(jīng)衰退疾病研究新工具---α-突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 

動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 對(duì)多巴胺能神經(jīng)元有毒性并且可以誘發(fā)帕金森病理現(xiàn)象(pSer129) 

(A) 經(jīng)寡聚體處理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元的存活率由抗 MAP2 抗體量化并表示為對(duì)照的百分比

(B) 經(jīng)寡聚體處理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元中存在的 α-突觸核蛋白 pSer129 水平通過(guò)抗 α-突觸核蛋白 pSer129 抗體與抗 MAP2 抗體的比率量化,表示為對(duì)照的百分比

 

所有數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)驗(yàn)證,而非偶然性結(jié)果 

神經(jīng)衰退疾病研究新工具---α-突觸核蛋白寡聚體(SPR-484)

動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 在大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元中誘導(dǎo)帕金森相關(guān)的pSer129病理現(xiàn)象 

(A)用對(duì)照PBS緩沖液處理后11天的大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元

(B) 用10 µg/mL SPR-484處理后11天的大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元

 

細(xì)胞核染色藍(lán)色(Hoechst),多巴胺能神經(jīng)元顯示紅色(MAP2),病理現(xiàn)象為綠色(α-syn pSer129)

 

注:SPR-484為E.coli 表達(dá)的,在加入神經(jīng)元之前沒(méi)有磷酸化

 

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